Dernière mise à jour le 15/10/06
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MESURIM PROFiche technique 5
Lecture optique d'électrophorèses

  • Téléchargement des fichiers nécessaires à la réalisation des exemples de la page (enregister au préalable les fichiers sur le disque dur)
    • Image des éléctrophorèses d'un sérum de lapin non immunisé et d'un sérum de lapin immunisé anti BSA (ayant subi plusieurs injections de sérum albumine bovine)
    • Fichier élève (au format .doc) de présentation et interprétation des spectres obtenus

Lecture optique des profils d'absorption de bandes d'électrophorèse.

Électrophorèse d'un sérum de lapin non immunisé et d'un sérum de lapin immunisé anti BSA, c'est-à-dire ayant subi de 4 à 6 injections de sérum albumine bovine en 8 semaines (niveau classe de TS - chapitre Sida et immunité)

  • Principe
    • Plus la concentration en protéines est forte dans une portion de bande d’électrophorèse, plus la coloration est forte.
    • On peut donc évaluer les concentrations des différentes catégories de protéines par mesure optique de la densité de coloration sur la bande.
    • Le profil d’absorption est lu avec les outils du logiciel Mesurim.
  • Protocole
    • Lancer Mesurim et ouvrir le fichier, l’image "TP3electroserum.jpg", accessible par le menu Fichier.
    • Cliquer sur l'icône de mesure (1) puis tracer par cliquer - glisser de gauche à droite, une ligne de préférence horizontale parcourant la première électrophorèse en son milieu ou une zone plus représentative : c’est la ligne selon laquelle la mesure d’absorption de lumière sera faite.
    • Choisir dans le menu de Type de mesure (2) : lumière sur une Bande. Une fenêtre de paramétrage apparaît. Paramétrer la mesure :
      • Largeur en pixel : 10
      • Mesure en absorption
      • Tout (tous les canaux de couleurs)
      • Mesure linéaire
    • Cliquer sur le bouton Mesurer. Un graphique du profil d’absorption s’affiche.
      • Choisir dans le menu Graphique de la fenêtre de Mesure d’intensité de couleur : fond blanc.
      • Copier.
    • Coller ce premier graphique dans la cellule adéquate du fichier "TP3electroserumElev.doc" ouvert dans Word.
    • Répéter le protocole pour le deuxième profil.
      ATTENTION : le graphe précédent reste affiché jusqu’à un nouveau clic sur Mesurer.
    • Coller le 2e graphique obtenu dans la cellule correspondante du tableau.
    • Redimensionner si nécessaire les images pour que le tableau tienne dans la page.
  • Pour interpréter les images à l'aide de vos acquis, il est possible de le faire dans Word (module Modifier Image), Paint ou même Mesurim.
    • Imprimer.
    • Enregistrer sous un autre nom.
Jean-Paul BERGER
Site SVT - Lycée Georges Pompidou - Sharjah - Emirats Arabes Unis
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